PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Haemonchus contortus is the major gastrointestinal parasite of sheep raised in tropical and subtropical areas worldwide. This trial aimed to evaluate the influence of H. contortus infection on the bone marrow response of Santa Ines (SI) and Ile de France (IF) suckling lambs experimentally infected with H. contortus. Fourteen SI lambs and 12 IF lambs were randomized in four groups: infected SI (n=8), non-infected SI (n=6), infected IF (n=8) and non-infected IF (n=4). Lambs of infected groups were submitted to 27 infections, conducted every two days, from 14 to 68 days of age, and each lamb received a total of 5400 H. contortus infective larvae (L3). Ten blood samples were obtained during the experimental period to be used for erythrocyte and leukocyte counts, packed cell volume and total plasma protein estimation. Additionally, it was carried out a differential leukocyte count. Lambs from control groups did not shed eggs in faeces all over the experiment, while infected Santa Ines and Ile de France lambs presented means of 2963 EPG (Eggs Per Gram of faeces) and 8175 EPG in the last sampling (P<0.05), respectively. Infected Santa Ines lambs had an increase in eosinophil release, however differences (P<0.05) on circulation number in comparison with infected Ile de France lambs were identified only in the last sampling (54 days post first infection). The mild H. cortortus infection did not produce significant changes in the blood variables of the Ile de France and Santa Ines suckling lambs.

• Haemathology sheep Santa Ines Ile de France lamb Haemonchus contortus infection Ovis aries gastrointestinal nematodes eosinophils

Abstract in Portuguese:

Haemonchus contortus é o principal parasita gastrintestinal de ovinos criados em áreas tropicais e subtropicais. Este estudo objetivou avaliar a influência da infecção por H. contortus na resposta medular de cordeiros lactentes das raças Santa Inês (SI) e Ile de France (IF) infectados experimentalmente com H. contortus. Quatorze cordeiros SI e 12 cordeiros IF, foram distribuídos em quatro grupos: SI infectado (n=8), SI não infectado (n=6), IF infectado (n=8) e IF não infectado (n=4). Cordeiros dos grupos infectados foram submetidos a 27 infecções, realizadas a cada dois dias, do 14º até 68º dia de vida, com um total de 5400 larvas infectantes (L3) de H. contortus por animal. Foram realizadas 10 coletas de sangue ao longo do período experimental para determinação do volume globular, proteínas plasmáticas totais, contagem de eritrócitos e leucócitos, além do diferencial de leucócitos. Cordeiros controles não infectados não eliminaram ovos nas fezes durante todo o experimento, enquanto que os cordeiros Santa Ines e Ile de France infectados apresentaram em média 2963 ovos por grama de fezes (OPG) e 8175 OPG na última coleta (P<0,05), respectivamente. Cordeiros Santa Inês infectados tiveram um aumento na produção de eosinófilos, mas diferenças (P<0.05) no número de eosinófilos sanguíneos em comparação a cordeiros Ile de France infectados foram detectadas somente na última coleta (54 dias após a primeira infecção). A infecção leve por H. cortortus não induziu alterações significativas nas variáveis sanguíneas de cordeiros lactentes Ile de France e Santa Inês.

• Hematologia ovino Santa Inês Ile de France cordeiro Haemonchus contortus infecção Ovis aries nematódeos gastrintestinais eosinófilos

Abstract in English:

ABSTRACT.- Casanova V.P., Aires A.R., Collet S.G., Krause A., Moresco R.N., Bochi G.V., Silva A.S. & Leal M.L.R. 2018. Iron supplementation for lambs experimentally infected by Haemonchus contortus: response to anemia and iron store in the bone marrow. [Suplementação com ferro em cordeiros infectados experimentalmente por Haemonchus contortus: resposta a anemia e as reservas de ferro na medula óssea.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(8):1543-1548. Departamento de Grandes Animais, Universidade de Santa Maria, Avenida Roraima 1000, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: martalizandra@gmail.com To evaluate the effect of supplementation of iron dextran on blood variables and iron metabolism in lambs experimentally infected by Haemonchus contortus, four experimental groups were used: uninfected and non-supplemented animals (GI); infected animals supplemented with iron (GII); uninfected animals supplemented with iron (GIII); and infected non-supplemented animals (GIV). Groups II and IV received 10,000 larvae (L3) of Haemonchus contortus, and groups II and III received three doses of iron dextran (20mg/kg) intramuscularly with seven days of interval. Blood and faeces samples were collected on days 10 (D10), 17 (D17), 24 (D24), and 31 (D31), in order to determine red blood cell counts, iron metabolism, and EPG. Infected animals developed anemia from D24 and anemia was more severe on D31. Animals from GII had higher hematocrit and hemoglobin concentration compared to animals of GIV on D31. Iron stores in the bone marrow were higher in GII and GIII compared to GI and GIV. The GIV showed lower seric levels of iron on D24 compared to the other groups. The iron supplementation reduces the severity of the anemia caused by infection with Haemonchus contortus in lambs, improving erythropoietic response after blood loss.

• Iron supplementation lambs Haemonchus contortus anemia bone marrow helminths anemia sheep clinics Suplementação com ferro cordeiros reserva de ferro medula óssea ferro cordeiros helmintos ovinos clínica.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Casanova V.P., Aires A.R., Collet S.G., Krause A., Moresco R.N., Bochi G.V., Silva A.S. & Leal M.L.R. 2018. Iron supplementation for lambs experimentally infected by Haemonchus contortus: response to anemia and iron store in the bone marrow. [Suplementação com ferro em cordeiros infectados experimentalmente por Haemonchus contortus: resposta a anemia e as reservas de ferro na medula óssea.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(8):1543-1548. Departamento de Grandes Animais, Universidade de Santa Maria, Avenida Roraima 1000, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: martalizandra@gmail.com Para avaliar o efeito da suplementação de ferro dextrano sobre variáveis &#8203;&#8203;sanguíneas e metabolismo do ferro em cordeiros experimentalmente infectados por Haemonchus contortus, foram utilizados quatro grupos experimentais: animais não infectados e não suplementados (GI); animais infectados e suplementados com ferro (GII); animais não infectados e suplementados com ferro (GIII); e animais não suplementados infectados (GIV). Os grupos II e IV receberam 10.000 larvas (L3) de Haemonchus contortus, e os grupos II e III receberam três doses de ferro dextrano (20mg/kg) por via intramuscular com sete dias de intervalo. As amostras de sangue e fezes foram coletadas nos dias 10 (D10), 17 (D17), 24 (D24) e 31 (D31), para determinar o eritrograma, o metabolismo do ferro e a quantidade de ovos por gramas de fezes (OPG). Os cordeiros infectados desenvolveram anemia no D24, sendo esta mais severa no dia 31. Os cordeiros do GII apresentaram maior hematócrito e concentração de hemoglobina em comparação com animais dd GIV no D31. Os estoques de ferro na medula óssea foram maiores no GII e GIII em comparação com o GI e GIV. O GIV mostrou menores níveis séricos de ferro no D24 em comparação com os outros grupos. A suplementação de ferro reduz a gravidade da anemia causada por infecção por Haemonchus contortus em cordeiros, melhorando a resposta eritropoietica após a perda de sangue.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Ribeiro W.L.C., Camurça-Vasconcelos A.L.F., Santos J.M.L., Macedo I.T.F., Ribeiro J.C., Oliveira E.F., Paula H.C.B. & Bevilaqua C.M.L. 2017. The use of Eucalyptus staigeriana nanoemulsion for control of sheep haemonchosis. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):221-226. Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Faculdade de Veterinária, Universidade Estadual do Ceará, Avenida Dr. Silas Munguba 1700, Fortaleza, CE 60714-903, Brazil. E-mail: bevilaqua.uece@gmail.com Sustainable control of gastrointestinal nematodes (GIN) in small ruminants has been based on the use of alternative methods, including targeted selective treatment, such as FAMACHA. Another GIN control alternative is the use of herbal medicines, although in many cases their use is based on empirical knowledge. Biopolymer nanoformulations has been investigated to maximize the essential oil effects against sheep gastrointestinal nematodes. The aim of the present study was to combine a Eucalyptus staigeriana essential oil nanoemulsion (EsNano) with FAMACHA as an alternative control for sheep haemonchosis. The study was performed over six months at a commercial sheep farm located in a semiarid region of Northeast Brazil. Initially, a fecal egg count reduction test (FECRT) in sheep with levamisole, ivermectin and oxfendazole in sheep was performed used to determine the most effective anthelmintic to use as the positive control. Levamisole has been selected because it showed efficacy superior to 95%. EsNano was obtained and then its physicochemical properties were characterized. The average (±SE) size of the particles in the nanoemulsion was 276.8 (±12.3) nm with bimodal distribution and polydispersity. Nine visits were performed, from April to September 2013, with an interval of 17 days. One hundred sixty-two male and female sheep were divided into three groups (n=54 each) and were treated when FAMACHA score was 3, 4, or 5: G-EsNano 250mg kg-1 EsNano; G-Lev 7.5mg kg-1 levamisole (positive control), and G-Neg was not treated (negative control). Feces from sheep were collected to quantify the number of eggs per gram of feces (epg) and to identify nematode genera. Sheep weight gain was monitored. The epg data for each group and the average sheep weight gains were analyzed by variance analysis and compared with the Tukey’s test (P<0.05). Significant difference between the number of animals treated with EsNano and levamisole was not observed in any visit (P>0.05). The epg variation was similar in the G-EsNano and G-Lev groups on visits (P>0.05), except the second and fifth evaluation in the epg groups were significantly different (P<0.05). Haemonchus spp. was the most prevalent nematode. There was no significant weight gain in any of the treated groups (P<0.05). The combination of phytotherapy and FAMACHA can be an alternative to minimize the use of synthetic anthelmintics to control resistant GIN populations of small ruminants.

• Haemonchus contortus essential oil chitosan óleo essencial quitosana

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Ribeiro W.L.C., Camurça-Vasconcelos A.L.F., Santos J.M.L., Macedo I.T.F., Ribeiro J.C., Oliveira E.F., Paula H.C.B. & Bevilaqua C.M.L. 2017. The use of Eucalyptus staigeriana nanoemulsion for control of sheep haemonchosis. [Uso da nanoemulsão de Eucalyptus staigeriana no controle da hemoncose em ovinos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):221-226. Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Faculdade de Veterinária, Universidade Estadual do Ceará, Avenida Dr. Silas Munguba 1700, Fortaleza, CE 60714-903, Brazil. E-mail: bevilaqua.uece@gmail.com O controle sustentável de nematoides gastrintestinais (NGI) em pequenos ruminantes tem sido baseado na utilização de métodos alternativos, incluindo o tratamento alvo-seletivo, tal como o FAMACHA. Outra alternativa de controle de NGI é o uso de plantas medicinais, embora, em muitos casos, a sua utilização seja baseada no conhecimento empírico. Nanoformulações biopoliméricas tem sido investigadas para maximizar os efeitos de óleos essenciais sobre nematoides gastrointestinais em ovinos. O objetivo do presente estudo foi combinar a nanoemulsão do óleo essencial de Eucalyptus staigeriana (EsNano) com o método FAMACHA como uma alternativa para o controle da hemoncose em ovinos. Este estudo foi realizado ao longo de seis meses em uma fazenda comercial de ovinos localizada em uma região semiárida do Nordeste do Brasil. Inicialmente, um teste de redução da contagem de ovos nas fezes (FECRT) em ovinos com levamisol, ivermectina e oxfendazole foi realizado para determinar o anti-helmíntico mais eficaz, para posterior uso como controle positivo. Levamisol foi selecionado porque mostrou eficácia superior a 95%. EsNano foi obtido e, em seguida, as suas propriedades físico-químicas foram caracterizadas. O tamanho médio (±SE) das partículas na nanoemulsão foi 276,8 (±12,3) nm, com distribuição bimodal e polidispersividade. Foram realizadas nove visitas, de abril a setembro de 2013, com um intervalo de 17 dias. Cento e sessenta e dois ovinos machos e fêmeas foram divididos em três grupos (n=54 cada) e foram tratados quando o FAMACHA foi 3, 4 ou 5: G-EsNano 250 mg kg-1 EsNano; G-Lev 7,5mg kg-1 de levamisol (controlo positivo), e G-Neg não foi tratado (controle negativo). As fezes dos ovinos foram coletadas para quantificar o número de ovos por grama de fezes (opg) e identificar os gêneros de nematóides. O ganho de peso de ovinos foi monitorado. Os dados do opg de cada grupo e os ganhos de peso médio dos ovinos foram analisados por análise de variância e comparadas com o teste de Tukey (P<0,05). Diferença significativa entre o número de animais tratados com EsNano e levamisol não foi observada em nenhuma visita (P>0,05). A variação opg foi semelhante para os grupos G-EsNano e G-Lev nas vistas (P>0,05), excetuando a segunda e quinta avaliação em que os opg dos grupos foram significativamente diferentes (P>0,05). O nematoide Haemonchus spp. foi o mais prevalente. Não houve aumento significativo de peso em qualquer um dos grupos tratados (P>0,05). Assim, a combinação de fitoterapia e FAMACHA pode ser uma alternativa para minimizar o uso anti-helmínticos sintéticos para controlar populações resistentes NGI em pequenos ruminantes.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Fernandes M.A.M., Gilaverte S., Buzatti A., Sprenger L.K., Silva C.J.A., Peres M.T.P., Molento M.B. & Monteiro A.L.G. 2015. [FAMACHA method for detecting clinical anemia caused by Haemonchus contortus in suckling lambs and lactating ewes.] Método FAMACHA para detectar anemia clínica causada por Haemonchus contortus em cordeiros lactentes e ovelhas em lactação. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(6):525-530. Laboratório de Produção e Pesquisa em Ovinos e Caprinos, Departamento de Zootecnia, Universidade Federal do Paraná, Rua dos Funcionários 1540, Curitiba, PR 80035-050, Brazil. E-mail: angela.ufpr@gmail.com The control of gastrointestinal parasites in small ruminants has traditionally involved the indiscriminate use of anthelmintic drugs that resulted in a high parasite selection pressure for anthelmintic resistance. Selective methods (ex.: FAMACHA/FMC and faecal egg count/EPG), which have good sensitivity to identify animals that need drug treatment, are important alternative methods for parasite control. The objective of this study was to determine the sensitivity and specificity of the FMC method to detect clinical anemia caused by Haemonchus contortus in two highly susceptible categories of Suffolk sheep; suckling lambs and lactating ewes. The ocular conjunctivae of 42 suckling lambs and 35 lactating ewes were evaluated using the FMC method at 14 days interval for five months. Hematocrit (Ht) served as the gold standard for anemia evaluation. To calculate the sensitivity and specificity of the FMC method, different criteria were adopted: animals classified as 4 and 5, or 3, 4 and 5, were considered to be anemic (positive test), and animals classified as 1, 2 and 3, or 1 and 2 were considered to be non-anemic (negative test). Three standard values of Ht (&#8804;22%, &#8804;19% or &#8804;15%) were used to confirm anemia. Among the prevalent genera of helminths H. contortus (61.5%) and Ostertagia sp. (21.3%) were the most predominant species in the coproculture. For both categories, the inclusion of FMC 3 as a positive test increased the sensitivity but decreased the specificity of the method. When FMC 3 was included as anemic, the percentage of false negative was close to zero, but a greater number of treatments were applied to non-anemic animals (false positive). Most of the lambs (73%) and ewes (57%) remained in categories 1 or 2 throughout the trial. Only 5% of the lambs and 8% of the ewes were classified as the two major stages of anemia (4 and 5). The results indicate that the FMC is a safe method to be used in lambs and lactating ewes with clinical anemia from H. contortus infection. For both categories, it was necessary to include FMC 3 as a positive condition to increase the sensitivity of the method and to reduce the risk of death of undiagnosed anemic animals (false negatives).

• FAMACHA method anemia Haemonchus contortus

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Fernandes M.A.M., Gilaverte S., Buzatti A., Sprenger L.K., Silva C.J.A., Peres M.T.P., Molento M.B. & Monteiro A.L.G. 2015. [FAMACHA method for detecting clinical anemia caused by Haemonchus contortus in suckling lambs and lactating ewes.] Método FAMACHA para detectar anemia clínica causada por Haemonchus contortus em cordeiros lactentes e ovelhas em lactação. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(6):525-530. Laboratório de Produção e Pesquisa em Ovinos e Caprinos, Departamento de Zootecnia, Universidade Federal do Paraná, Rua dos Funcionários 1540, Curitiba, PR 80035-050, Brazil. E-mail: angela.ufpr@gmail.com O controle das endoparasitoses gastrintestinais em pequenos ruminantes tem sido tradicionalmente realizado por meio do uso indiscriminado dos anti-helmínticos, porém essa prática tem resultado em grande pressão de seleção de parasitas resistentes. Métodos seletivos (ex: FAMACHA/FMC e contagem de ovos nas fezes/OPG) e que apresentem boa sensibilidade para identificar os animais que necessitam receber o tratamento químico são importantes alternativas aos métodos tradicionais. O objetivo desse trabalho foi determinar a sensibilidade e a especificidade do método FMC, usado para detectar anemia causada por Haemonchus contortus em ovinos da raça Suffolk, em duas categorias de alta suscetibilidade; cordeiros lactentes e ovelhas durante a fase de lactação. A conjuntiva ocular de 42 cordeiros lactentes e 35 ovelhas em lactação foi avaliada usando o método FMC, em intervalos de 14 dias, durante cinco meses. O hematócrito (Ht) foi utilizado como padrão-ouro para avaliação clínica de anemia dos animais. Para o cálculo de sensibilidade e especificidade, diferentes critérios foram utilizados: animais classificados como 4 e 5 ou 3, 4 e 5 e anêmicos pelo Ht (teste positivo); animais classificados como 1, 2 e 3 ou 1 e 2 e não anêmicos pelo Ht (teste negativo). Três valores de corte para Ht (&#8804;22%, &#8804;19% ou &#8804;15%) foram utilizados para confirmar a anemia. Entre os gêneros observados nas coproculturas, H. contortus (61,5%) e Ostertagia sp. (21,3%) foram os mais prevalentes. Em ambas as categorias, a inclusão do FMC 3 como teste positivo, elevou a sensibilidade mas reduziu a especificidade do método. Quando o FMC 3 foi considerado anêmico, o percentual de falsos negativos foi próximo a zero, no entanto, houve aumento no número de tratamentos aplicados em animais não anêmicos (falso positivo). Durante as avaliações, a maior parte dos cordeiros (73%) e das ovelhas (53%) permaneceu nas categorias de FMC 1 e 2. Apenas 5% dos cordeiros e 8% das ovelhas foram classificados com os dois maiores graus de anemia (FMC 4 e 5). Os resultados indicam que o FMC pode ser utilizado para identificar os cordeiros lactentes e ovelhas em fase de lactação com sinais clínicos de anemia decorrentes da infecção por H. contortus. Para ambas as categorias, foi necessário incluir o FMC 3 como positivo para aumentar a sensibilidade do método; reduzindo o risco de morte de animais anêmicos não diagnosticados (falsos negativos).

Abstract in English:

ABSTRACT.- Ribeiro A.R.C., Andrade F.D., Medeiros M.C., Camboim A.S., Pereira Jr F.A., Athayde A.C.R., Rodrigues O.G. & Silva W.W. 2014. [Study of the anthelminthic activity of the ethanol extract of Jatropha mollissima (Pohl) Baill. (Euphorbiaceae) on Haemonchus contortus in sheep of the Paraiba semiarid, Brazil.] Estudo da atividade anti-helmíntica do extrato etanólico de Jatropha mollissima (Pohl) Baill. (Euphorbiaceae) sob Haemonchus contortus em ovinos no semiárido paraibano. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(11):1051-1055. Programa de Pós-Graduação em Zootecnia, Universidade Federal de Campina Grande, Rodovia Patos-Teixeira, Km Zero, Jatobá, Patos PB 58700-970, Brazil. E-mail: a.raquel.ribeiro@hotmail.com This study aimed to evaluate the anthelmintic effect of Jatropha mollissima through in vitro and in vivo experiments. Initially we investigated the concentration of extract with bioactive effect, through the toxicity evolution test of the ethanol extract of J. mollissima on the microcrustacean Artemia salina, obtaining CL50 concentration of 660.80µg/ml, which was tested in fecal cultures containing infective larvae of Haemonchus contortus and in animals for the verification of OPG reduction. For in vivo test, the extract was dissolved in water to obtain concentrations of 660.80µg/ml and 1321.6µg/ml. Feces were collected weekly and blood was collected every fifteen days. As a result of in vitro test, the ethanol extract of the stem of J. mollissima proved toxic on A. salina, with CL50 less than 1000µg/ml and inhibited the eggs hatching and the development of larvae of H. contortus, presenting an efficiency of 70.77%. In vivo test revealed that the extract is also effective in sheep, with a significant reduction in the count of OPG after 28 days of experiment, 47 and 44% of reduction in the groups treated with the extract, 7.5% in the untreated group of animals and 40.6% with ivermectin. Even parasitized, the animals remained clinically healthy and without anemia. The ethanol extract of the stem of Jatropha mollissima may represent an alternative to the control of sheep worms, because it slows the parasitic resistance.

• Medicinal plants Jatropha mollissima Euphorbiaceae Haemonchus contortus plantas medicinais

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Ribeiro A.R.C., Andrade F.D., Medeiros M.C., Camboim A.S., Pereira Jr F.A., Athayde A.C.R., Rodrigues O.G. & Silva W.W. 2014. [Study of the anthelminthic activity of the ethanol extract of Jatropha mollissima (Pohl) Baill. (Euphorbiaceae) on Haemonchus contortus in sheep of the Paraiba semiarid, Brazil.] Estudo da atividade anti-helmíntica do extrato etanólico de Jatropha mollissima (Pohl) Baill. (Euphorbiaceae) sob Haemonchus contortus em ovinos no semiárido paraibano. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(11):1051-1055. Programa de Pós-Graduação em Zootecnia, Universidade Federal de Campina Grande, Rodovia Patos-Teixeira, Km Zero, Jatobá, Patos PB 58700-970, Brazil. E-mail: a.raquel.ribeiro@hotmail.com Objetivou-se com o presente trabalho, avaliar o efeito anti-helmíntico de Jatropha mollissima por meio de experimentos in vitro e in vivo. Inicialmente foi investigada a concentração de extrato com efeito bioativo, pelo teste de evolução da toxicidade do extrato etanólico de J. mollissima sobre o microcrustáceo Artemia salina, obtendo uma CL50 de 660,80µg/ml, que foi testada em coproculturas contendo larvas infectantes de Haemonchus contortus e em animais para a verificação da redução do OPG. Para o teste in vivo o extrato foi dissolvido em água para se obter as concentrações 660,80µg/ml e 1321,6µg/ml, foram coletadas fezes semanalmente e sangue quinzenalmente. Como resultados dos testes in vitro, o extrato etanólico do caule de Jatropha mollissima mostrou-se tóxico sobre A. salina, com CL50 abaixo de 1000 µg/ml e inibiu a eclosão de ovos e o desenvolvimento de larvas de H. contortus, apresentando uma eficiência de 70,77%. O teste in vivo revelou que o extrato é também eficaz em ovinos, com redução significativa na contagem de OPG após 28 dias de experimento, 47 e 44% de redução nos grupos tratados com o extrato, 7,5% no grupo de animais não tratados e 40,6% com a ivermectina. Mesmo parasitados, os animais permaneceram clinicamente saudáveis e sem anemia. O extrato etanólico do caule de Jatropha mollissima pode representar uma alternativa ao controle da verminose ovina, pois retarda a resistência parasitária.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Andrade F.D., Ribeiro A.R.C., Medeiros M.C., Fonseca S.S., Athayde A.C.R., Ferreira A.F., Rodrigues O.G. & Silva W.W. 2014. [Anthelmintic action of the hydroalcoholic extract of the root of Tarenaya spinosa (Jacq.) Raf. for Haemonchus contortus control in sheep.] Ação anti-helmíntica do extrato hidroalcóolico da raiz da Tarenaya spinosa (Jacq.) Raf. no controle de Haemonchus contortus em ovinos. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(10):942-946. Laboratório de Patologia Clínica, Hospital Veterinário, Universidade Federal de Campina Grande, Rodovia Patos-Teixeira Km Zero, Jatobá, Patos, PB 58700-970, Brazil. E-mail: a.raquel.ribeiro@hotmail.com To investigate the anthelmintic potential of hydroalcoholic extract of the root of Tarenaya spinosa, as an alternative in the control of gastrointestinal nematode Haemonchus contortus in sheep, in vitro tests were performed with Artemia salina then on stool cultures containing helminth eggs, assessing ovicidal and larvicidal action of the extract. After preliminary tests, the in vivo test was performed in 20 male sheep were divided into four treatments: Group 1 Ivermectin 1 %, Group 2: untreated; Group 3: hydroalcoholic extract of T. spinosa 150&#956;g/mL; Group 4: hydroalcoholic extract T. spinosa 300&#956;g/mL, stool samples and blood were collected for parasitological and haematological tests. In in vitro tests, toxicity against A. salina was 150&#956;g/mL, there was obtained 81.53% efficiency against eggs and larvae of H. contortus. In vivo test, evaluating the effectiveness of treatments was performed by reduction test in faecal egg count (RCOF), the groups treated with Ivermectin and T. spinosa the 150&#956;g/mL and 300&#956;g/mL obtained the best results, reducing OPG after 28 days in 40.6, 41 and 42.6% respectively, thus revealing its herbal potential for control of gastrointestinal nematodes in sheep.

• Tarenaya spinosa Haemonchus contortus

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Andrade F.D., Ribeiro A.R.C., Medeiros M.C., Fonseca S.S., Athayde A.C.R., Ferreira A.F., Rodrigues O.G. & Silva W.W. 2014. [Anthelmintic action of the hydroalcoholic extract of the root of Tarenaya spinosa (Jacq.) Raf. for Haemonchus contortus control in sheep.] Ação anti-helmíntica do extrato hidroalcóolico da raiz da Tarenaya spinosa (Jacq.) Raf. no controle de Haemonchus contortus em ovinos. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(10):942-946. Laboratório de Patologia Clínica, Hospital Veterinário, Universidade Federal de Campina Grande, Rodovia Patos-Teixeira Km Zero, Jatobá, Patos, PB 58700-970, Brazil. E-mail: a.raquel.ribeiro@hotmail.com Para investigar o potencial anti-helmíntico do extrato hidroalcóolico da raiz de Tarenaya spinosa, como alternativa no controle do nematóide gastrintestinal Haemonchus contortus de ovinos, foram realizados testes in vitro com Artemia salina, em seguida, sobre coproculturas contendo ovos do helminto, avaliando a ação ovicida e larvicida do extrato. Após os testes preliminares, foi realizado o teste in vivo em 20 ovinos machos os quais foram divididos em quatro tratamentos Grupo 1: ivermectina 1%; Grupo 2: sem tratamento; Grupo 3: extrato hidroalcóolico de T. spinosa 150&#956;g/mL; Grupo 4: extrato hidroalcóolico de T. spinosa 300&#956;g/mL, amostras de fezes e de sangue foram coletadas para exames parasitológicos e hematológicos. No teste in vitro, a toxicidade frente a A. salina foi de 150&#956;g/mL, obteve-se eficiência de 81,53% sobre ovos e larvas do H. contortus. No teste in vivo, a avaliação da eficácia dos tratamentos foi realizada pelo teste de redução na contagem de ovos fecais (RCOF), os grupos tratados com Ivermectina e T. spinosa a 150&#956;g/mL e 300&#956;g/mL obtiveram os melhores resultados, reduzindo o OPG após 28 dias em 40,6, 41 e 40,2% respectivamente, revelando assim seu potencial fitoterápico para fins de controle de nematódeos gastrintestinais em ovinos.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Fortes F.S. & Molento M.B. 2013. [Anthelmintic resistance in gastrointestinal nematodes of small ruminants: advances and limitations for diagnosis.] Resistência anti-helmíntica em nematoides gastrintestinais de pequenos ruminantes: avanços e limitações para seu diagnóstico. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(12):1391-1402. Laboratório de Doenças Parasitárias, Universidade Federal do Paraná, Rua dos Funcionários 1540, Curitiba, PR 80035-050, Brazil. E-mail: fortesfs@gmail.com The selection and growing spread of resistant nematodes to the most commonly used anthelmintics, benzimidazoles (BZs), imidazoles and macrocyclic lactones (MLs), constitutes a serious obstacle of small ruminants production worldwide. The use of efficient and sensitive methods for detection and monitoring of anthelmintic resistance in the field becomes urgent, especially for the BZs and MLs groups due to its frequent resistant reports. Obtaining an early and accurate diagnosis of resistance is extremely important to aid decision-making regarding parasite control programs, with the objective to preserve the lifespan of existing products, and to limit the development of resistance in nematode populations. The in vivo tests and the more recent in vitro tests have been developed for the detection of nematode resistant to the major anthelmintic groups. However, the availability of validated in vitro tests and its practical use is still very limited. Although the faecal egg-count reduction test (FECRT, in vivo - indirect) is the primary method of choice for the detection of resistance in the field it has being criticized for its results and is receiving significant modifications. Moreover, the development of molecular techniques from genomic changes have generated considerable advances in this research area, with the use of mutations at codons 167, 198 and 200 of &#946;-tubulin gene as the main SNPs (single nucleotide polymorphisms) associated with BZs resistance. This review aims to discuss the available diagnostic methods for the detection of anthelmintic resistance in nematodes of small ruminants, highlighting key developments and obstacles to its use in the laboratory and in the field.

• Anthelmintics anthelmintic resistance nematoides gastrintestinais Haemonchus contortus anti-helmínticos resistência anti-helmíntica nematoides gastrintestinais

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Fortes F.S. & Molento M.B. 2013. [Anthelmintic resistance in gastrointestinal nematodes of small ruminants: advances and limitations for diagnosis.] Resistência anti-helmíntica em nematoides gastrintestinais de pequenos ruminantes: avanços e limitações para seu diagnóstico. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(12):1391-1402. Laboratório de Doenças Parasitárias, Universidade Federal do Paraná, Rua dos Funcionários 1540, Curitiba, PR 80035-050, Brazil. E-mail: fortesfs@gmail.com A seleção e a crescente disseminação de nematoides resistentes aos anti-helmínticos mais comumente utilizados, benzimidazóis (BZs), imidazotiazóis e lactonas macrocíclicas (LMs), constituem um sério entrave na produção de pequenos ruminantes em todo o mundo. O uso de métodos eficientes e sensíveis para a detecção e o monitoramento da resistência anti-helmíntica no campo torna-se urgente, especialmente para os grupos de BZs e LMs, devido aos constantes relatos de resistência. A obtenção de um diagnóstico preciso e precoce da resistência é extremamente importante para auxiliar a tomada de decisão em programas de controle parasitário, com o objetivo de preservar a vida útil dos produtos e limitar o desenvolvimento da resistência nas populações de nematoides. Os testes in vivo e, mais recentemente, os testes in vitro têm sido desenvolvidos para a detecção de nematoides resistentes aos principais grupos de anti-helmínticos. No entanto, a disponibilidade de testes in vitro validados e o seu uso prático ainda são muito limitados. Embora o teste de redução na contagem de ovos nas fezes (TRCOF, in vivo - indireto) seja o principal método de escolha para a detecção de resistência no campo, vem recebendo críticas quanto à validade dos resultados, e passa por significativas modificações. Além disso, o desenvolvimento de técnicas moleculares a partir de alterações genômicas gerou avanços consideráveis nessa área de investigação, com o uso de mutações nos códons 167, 198 e 200 do gene da &#946;-tubulina como principais SNPs (polimorfismos de nucleotídeo único; do inglês Single Nucleotide Polymorphisms) associados à resistência aos BZs. A presente revisão tem o objetivo de discutir os métodos de diagnóstico disponíveis para a detecção de resistência anti-helmíntica em nematoides de pequenos ruminantes, destacando progressos e obstáculos para seu uso na rotina laboratorial e no campo.

Abstract in English:

ABSTRACT.- González-Garduño R., Mendoza-de Gives P. & Torres-Hernández G. 2013. Variability in the fecal egg count and the parasitic burden of hair sheep after grazing in nematode infected paddocks. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(4):469-475. Universidad Autónoma Chapingo, Unidad Regional Universitaria Sursureste, P.O. Box 29 Teapa, 86800 Tabasco, México. E-mail address: robgardu@hotmail.com This study aimed to evaluate the variability in the fecal egg count (FEC) and the parasitic burden of naive hair sheep after grazing in nematode infected paddocks. The research was carried out in Tabasco, Mexico, during two periods (August and December). In each period 32 lambs were grazed for one month on African star grass (Cynodon plectostachyus) contaminated with gastrointestinal parasitic nematodes. FEC, packed cell volume (PCV) and body weight (BW) were recorded. Gastrointestinal worms were recovered at necropsy. Data were analyzed with the MIXED procedure of SAS using a model of repeated measurements over time. A higher number of Haemonchus contortus worms was found in December (2814±838) than in August (1166±305). The opposite occurred with Cooperia curticei (2167±393 and 3638±441, respectively). The FEC and correlation coefficient in respect to the worm burden were higher in December (6516 ± 1599, r=0.83, respectively) than in August (4364±771, r=0.44, respectively). A high variability in resistance-susceptibility to gastrointestinal nematodes (GIN) occurred in Katahdin × Pelibuey lambs after grazing.

• Haemonchus contortus Cooperia curticei Oesophagostomum columbianum egg count parasitic burden

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- González-Garduño R., Mendoza-de Gives P. & Torres-Hernández G. 2013. Variability in the fecal egg count and the parasitic burden of hair sheep after grazing in nematode infected paddocks. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(4):469-475. Universidad Autónoma Chapingo, Unidad Regional Universitaria Sursureste, P.O. Box 29 Teapa, 86800 Tabasco, México. E-mail address: robgardu@hotmail.com This study aimed to evaluate the variability in the fecal egg count (FEC) and the parasitic burden of naive hair sheep after grazing in nematode infected paddocks. The research was carried out in Tabasco, Mexico, during two periods (August and December). In each period 32 lambs were grazed for one month on African star grass (Cynodon plectostachyus) contaminated with gastrointestinal parasitic nematodes. FEC, packed cell volume (PCV) and body weight (BW) were recorded. Gastrointestinal worms were recovered at necropsy. Data were analyzed with the MIXED procedure of SAS using a model of repeated measurements over time. A higher number of Haemonchus contortus worms was found in December (2814±838) than in August (1166±305). The opposite occurred with Cooperia curticei (2167±393 and 3638±441, respectively). The FEC and correlation coefficient in respect to the worm burden were higher in December (6516 ± 1599, r=0.83, respectively) than in August (4364±771, r=0.44, respectively). A high variability in resistance-susceptibility to gastrointestinal nematodes (GIN) occurred in Katahdin × Pelibuey lambs after grazing.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Fortes F.S., Kloster F.S., Schafer A.S., Bier D., Buzatti A., Yoshitani U.Y. & Molento M.B. 2013. Evaluation of resistance in selected field strain of Haemonchus contortus to ivermectin and moxidectin using the Larval Migration on Agar Test. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(2):183-187. Laboratório de Doenças Parasitárias, Universidade Federal do Paraná, Rua dos Funcionários 1540, Curitiba, PR 80035-050, Brazil. E-mail: fortesfs@gmail.com Haemonchus contortus is one of the most common and economically significant causes of disease in small ruminants worldwide, and the control programs of parasitic nematodes - including H. contortus - rely mostly on the use of anthelmintic drugs. The consequence of the use of this, as the sole sanitary strategy to avoid parasite infections, was the reduction of the efficacy of all chemotherapeutic products with a heavy selection for resistance. The widespread of anthelmintic resistance and the difficulty of its early diagnosis has been a major concern for the sustainable parasite management on farms. The objective of this research was to determine and compare the ivermectin (IVM) and moxidectin (MOX) effect in a selected field strain of H. contortus with a known resistance status, using the in vitro larval migration on agar test (LMAT). Third stage larvae of the selected isolate were obtained from faecal cultures of experimentally infected sheep and incubated in eleven increasing diluted concentrations of IVM and MOX (6, 12, 24, 48, 96, 192, 384, 768, 1536, 3072 and 6144µg/mL). The dose-response sigmoidal curves were obtained using the R2 value of >0.90 and the lethal concentration (LC50) dose for the tested anthelmintic drugs using a four-parameter logistic model. The LC50 value for MOX was significantly lower than IVM (1.253µg/mL and 91.06µg/mL), identifying the H. contortus isolate as considerably less susceptible to IVM compared to MOX. Furthermore, the LMAT showed a high consistency (p<0.0001) and provided to be a useful diagnostic tool for monitoring the resistance status of IVM and MOX in H. contortus field isolate, as well as it may be used for official routine drug monitoring programs under the Ministry of Agriculture (MAPA) guidance.

• Haemonchus contortus anthelmintics ivermectin moxidectin anti-helmínticos ivermectina moxidectina

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Fortes F.S., Kloster F.S., Schafer A.S., Bier D., Buzatti A., Yoshitani U.Y. & Molento M.B. 2013. Evaluation of resistance in selected field strain of Haemonchus contortus to ivermectin and moxidectin using the Larval Migration on Agar Test. [Avaliação da resistência em um isolado de campo selecionado de Haemonchus contortus à ivermectina e moxidectina usando o Teste de Migração de Larvas em Ágar.] Pesquisa Veterinária Brasileira 33(2):183-187. Laboratório de Doenças Parasitárias, Universidade Federal do Paraná, Rua dos Funcionários 1540, Curitiba, PR 80035-050, Brazil. E-mail: fortesfs@gmail.com Haemonchus contortus é uma das causas mais comuns e economicamente significativas de doença em produções de pequenos ruminantes em todo o mundo, e os programas de controle de parasitas nematoides - incluindo H. contortus - baseiam-se principalmente no uso de drogas anti-helmínticas. A consequência da utilização desses compostos, como sendo a única estratégia sanitária para evitar infecções por parasitas, tem sido a redução da eficácia de todos os produtos quimioterápicos, selecionando fortemente para resistência. O desenvolvimento generalizado da resistência anti-helmíntica e a dificuldade de seu diagnóstico precoce têm sido uma grande preocupação para o manejo sustentável de parasitas no campo. O objetivo desta pesquisa foi determinar e comparar o efeito da ivermectina (IVM) e da moxidectina (MOX) em um isolado de campo selecionado de H. contortus com um estado de resistência conhecido, utilizando o teste in vitro de migração de larvas em ágar (LMTA). Larvas de terceiro estágio de um isolado de H. contortus selecionado foram obtidas a partir de culturas de fezes de ovinos infectados experimentalmente e incubadas em onze concentrações diluídas crescentes de IVM e MOX (6, 12, 24, 48, 96, 192, 384, 768, 1536, 3072 e 6144µg/mL). As curvas sigmoides de dose-resposta foram obtidas utilizando o valor de R2 >0,90 e a dose de concentração letal (CL50) para as drogas anti-helmínticas testadas, utilizando um modelo logístico de quatro parâmetros. O valor de CL50 para MOX foi significativamente menor do que para IVM (1,253µg/mL e 91,06µg/mL), identificando o isolado de H. contortus como consideravelmente menos suscetível à IVM em comparação à MOX. Além disso, o LMTA mostrou uma alta consistência (p<0,0001) e pode ser uma ferramenta útil de diagnóstico para monitorar o status de resistência de IVM e MOX em isolado de campo de H. contortus, assim como ser utilizado de forma oficial e em rotina para programas de monitoramento das drogas sob a demanda do Ministério da Agricultura (MAPA).

Abstract in English:

ABSTRACT.- Borges F.A., Rossini J.B., Velludo P.P., Buzzulini C., Costa G.H., Molento M.B. & Cos-ta A.J. 2011. Weak phenotypic reversion of ivermectin resistance in a field resistant isolate of Haemonchus contortus by verapamil. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(9):731-736. Departamento de Medicina Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Campo Grande, MS 79070-900, Brazil. E-mail: fernando.borges@ufms.br Recent advances in anthelmintic resistant phenotype reversion by Pgp modulating drugs in ruminant nematodes indicate that this can be a useful tool to helminth control. The aim of the present study was to evaluate the efficacy of ivermectin (IVM) in combination with verapamil (VRP), in oil or water-based vehicle, against an IVM-resistant field isolate of Haemonchus contortus through a larval migration assay and experimental infection trial. In the in vitro assay was observed a phenotypic reversion of H. contortus resistance to ivermectin at a high concentration of VRP, increasing IVM efficacy from 53.1% to 94.3. In the in vivo trial, IVM + VRP demonstrated 36.02% efficacy compared to the 7.75% of IVM alone. The vehicle formulation showed no influence in efficacy. These are the first results demonstrating the effect of VRP as a partial IVM-resistance phenotype reverser in a field isolate of IVM-resistant H. contortus experimentally inoculated in sheep.

• Haemonchus contortus ivermectin verapamil ivermectina

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Borges F.A., Rossini J.B., Velludo P.P., Buzzulini C., Costa G.H., Molento M.B. & Cos-ta A.J. 2011. Weak phenotypic reversion of ivermectin resistance in a field resistant isolate of Haemonchus contortus by verapamil. [Reversão fenotípica da resistência a ivermectina em isolado de campo de Haemonchus contortus pelo verapamil.] Pesquisa Veterinária Brasileira 31(9):731-736. Departamento de Medicina Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Campo Grande, MS 79070-900, Brazil. E-mail: fernando.borges@ufms.br Avanços recentes na reversão fenotípica da resistência anti-helmíntica por drogas moduladoras de Pgp em nematódeos de ruminantes indicam que esta pode ser uma ferramenta útil no controle de helmintos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia da ivermectina (IVM), em combinação com o verapamil (VRP), em veículo oleoso ou à base de água, contra um isolado de campo de H. contortus resistente por meio de teste de migração de larvas e infecção experimental em ovinos. No teste in vitro, observou-se reversão fenotípica da resistência de Haemonchus contortus à ivermectina com alta concentração de VRP, aumentando a eficácia da IVM de 53,1% para 94,3. No teste in vivo, IVM + VRP demonstrou 36,02% de eficácia em relação a 7,75% de IVM sozinha. O veículo da formulação não apresentou influência na eficácia. Estes são os primeiros resultados que demonstram o efeito da VRP como reversor parcial do fenótipo da resistência de IVM-fenótipo em um isolado de campo de H. contortus resistente, inoculado experimentalmente em ovinos.